具有典型的臨牀特徵：受累骨骼肌的易疲勞性和無力，經休息或用膽鹼酯酶抑制劑後症狀減輕或消失。
且具下列條件之一者方可確診：
1)甲基硫酸新斯的明藥物試驗陽性：每次0.04mg/kg，肌肉注射。新生兒0.1～0.15mg，兒童常用量0.25～0.50mg，最大量≤1.00mg，觀察30min肌力改善爲陽性。也可用騰喜龍(tensilon)0.2mg/kg肌肉注射，1min內肌力改善，作用持續不到5min;因該藥物作用時間短，小兒哭鬧不易觀察，故不適用於嬰幼兒，適用於重症MG或肌無力危象患兒。在藥物試驗過程中，出現嚴重的副交感刺激症狀(腸絞痛、流誕、心率過緩等)時，可用硫酸阿托品0.01mg/kg，肌肉注射。
2)重複神經電刺激(RNS)陽性：採用肌電圖儀，檢測面、尺和正中神經。刺激頻率爲l、2、3、10和20Hz，持續時間爲3s。結果判斷以第5波與第1波相比，波幅衰減如大於或等於10%定爲陽性。
3)AchR-Ab檢測陽性，AchR-Ab陽性對MG診斷有重要意義，但結果陰性亦不能排除本病。JMG患兒AchR-Ab陽性率爲33%，可能與小兒眼肌型居多及症狀輕有關。
